يعتبر الفصل الكروماتوغرافي السائل عالي الأداء الذي يشار إليه في الأصل كروماتوغرافيا السائل عالي الضغط ، تقنية مهمة للغاية في عالم الكيمياء التحليلية. يتم استخدامه عادة للفصل والتعرف وكذلك القياس الكمي لكل مكون موجود في الخليط. تعتمد الطريقة على المضخات لتمرير مذيب سائل مضغوط يحتوي على خليط العينة عبر عمود مليء بمادة ممتصة صلبة.
عادة ، يتفاعل كل عنصر موجود في خليط العينة بشكل مختلف قليلاً مع المادة الماصة. وهذا بدوره يتسبب في معدلات تدفق مختلفة للمكونات المتغيرة وبالتالي يؤدي إلى فصل العناصر عند مغادرتها العمود. تم استخدام هذه التقنية المهمة للغاية في التصنيع – في إنتاج المستحضرات الصيدلانية وكذلك المنتجات البيولوجية. كما تم استخدامه في مجالات حيوية أخرى مثل العمليات القانونية (في تحديد عقاقير تحسين الأداء في البول) ، في البحث وحتى في المجال الطبي مثل أثناء تحديد مستويات فيتامين د في اختبارات مصل الدم.
من ناحية أخرى ، يُعرّف عامل الاستجابة بأنه النسبة بين تركيز مادة كيميائية قيد التحليل واستجابة الكاشف لتركيز المادة التحليلية. يقسم التركيز على منطقة الذروة للحصول على عامل الاستجابة. على سبيل المثال ، افترض أنك تتعامل مع محلول من ثلاث مواد. إن أبسط طريقة لفصل هذه العناصر هي غمرها في مادة ماصة ثم حقنها في HPLC. يقدم مخطط الكروماتوجرام المستخدم استجابة من الكاشف باعتبارها ذروة المكونات المتغيرة. في كروماتوغرافيا الغاز ، وكذلك منهجية التحليل ، هذه الاختلافات هي المسؤولة عن الاختلافات المختلفة التي شوهدت. عند العثور على عامل استجابة لمادة كيميائية معينة ، يمكن بسهولة حساب تركيز المادة الكيميائية في العينات المستقبلية من استجابة الكاشف للعينة المذكورة.
لا شك أن عوامل الاستجابة بالغة الأهمية في تطبيق كروماتوغرافيا الغاز فيما يتعلق بالتحليل الكمي. ومع ذلك ، هناك أيضًا حاجة ملحة لمتابعة أسلوب يمكن أن يساعد في التخلص من أي اختلافات محتملة في عامل الاستجابة. هناك وسيلة بسيطة وعملية لتحقيق ذلك من خلال استخدام عوامل الاستجابة النسبية (RRF) والمعايير الداخلية في معايرة كروماتوغرافيا الغاز. يتم الحصول على الترددات الراديوية من خلال معايرة اللوني باستخدام الحلول القياسية المعروفة.
عامل الاستجابة في تحليل HPLC يستخدم بشكل كبير في إنتاج المستحضرات الصيدلانية. للحصول على معيار الشوائب ، من المهم إنشاء شوائب في مكونات المستحضرات الصيدلانية وإجراء تحليلها. على ما يبدو ، لا يمكن أن يحدث هذا إلا إذا تم الحصول على RF ثم تم استخدام RRF. يأتي هذا الأخير في نهج بديل لتحديد كمية الشوائب الموجودة في المنتجات الصيدلانية.
تستلزم العملية مراقبة وتقييم منطقة الذروة لكل مكون. للحصول على RRF ، يجب على المرء أن يقسم عامل الاستجابة للشوائب على عامل المكون الصيدلاني النشط (RFimpurity / RFAPI). هذا يعني أنه يمكن الحصول على عامل الاستجابة الدقيق من خلال التحليل الكمي لمعيار API والشوائب. للحصول على RRF دقيق ، يجب حساب منحدر تركيز المنطقة وكذلك معيار الشوائب.
